Ланчана реакција полимеразом и њена природа и опсег

Полимерасе цхаин реацтион (ПЦР) - метод молекуларне биологије, што омогућава да открије у биолошком материјалу малим количинама дезоксирибонуклеинске киселине (ДНК), односно неке од његових фрагмената, и множи их много пута. Затим су визуелно идентификовани путем гел електрофорезе. Реакција је развијен у 1983. К. Муллис и укључена у листу изузетних открића посљедњих година.

Који су механизми ПЦР-

Цео поступак се заснива на способности нуклеинских киселина у себи понављања, који у овом случају одржаном вештачки у лабораторији. ДНК репликација не може почети било којем региону молекула, али само у подручјима са специфичну секвенцу нуклеотида - полазних фрагмената. Да би ланчане реакције полимеразе почело, морамо прајмера (или ДНК пробе). То су кратки фрагменти ДНК секвенци са датом нуклеотидном секвенцом. Они су комплементарне (т.ј., који одговара) почетак узорак ДНК делова.

Наравно, да створи прајмера, научници морају проучавају секвенцу нуклеотида нуклеинске киселине, која је укључена у поступку. Ови ДНК сонди обезбеди специфичност реакције и њене иницијације. Ланчана реакција полимеразом неће ићи ако узорак не пронађе најмање један молекул жељеног ДНК. Уопштено, реакција захтева горе прајмера, низ нуклеотида, отпорна на топлоту ДНК полимеразе. Потоњи је ензим - каталитичке реакције синтезе нових молекула нуклеинске киселине на основу узорка. Све ове супстанце, укључујући биолошке материје, која је неопходна за идентификацију ДНК су комбиноване у реакциону смешу (раствор). Налази се у посебној термостат који врши своју веома брзо загревање и хлађење у одређеном року - циклус. Они су обично 30-50.

Како је ова реакција

Суштина овога је да се током једног циклуса, прајмери су везани делове жељеног ДНК, након чега иде удвостручује ензимом. На основу добијених ДНК ланаца синтетисаних у каснијим циклусима више комада идентичних молекула.

Полимераза ланчаном реакцијом је доследно опоравио према његовим корацима. Карактерише га најпре дуплирањем количину производа током сваког циклуса грејања и хлађења. У другом кораку реакције јавља успоравање јер ензим оштећен и губи активност. Поред тога, испражњена залихе нуклеотида и прајмера. У последњој фази - платоу - производи се више не акумулирају као реагенси у.

Где се користи

Несумњиво, најшири апликација ланчана реакција полимеразе налази у медицини и науци. Користи се у јавном и приватном биологије, ветерине, фармације, па чак и екологије. Док други раде за праћење квалитета хране и објеката на животну средину. Активно користи ланчане реакције полимеразе у форензичким пракси потврдити очинства и идентификацију идентитета особе. У форензичке науке, као иу палеонтологије, често овај метод је једини начин, јер је обично на располагању за проучавање изузетно мале количине ДНК. Наравно, веома широко коришћен метод се налази у медицинској пракси. Он ју је потребна у областима као што су генетика, инфективне и онколошких болести.