Молецулар Диагностицс: реал-тиме ПЦР

Тренутно, Молекуларна дијагностика механизам дизајниран ланчана реакција полимеразе (ПЦР), који је био подстицај за развој великог броја метода дијагностике болести, на основу утврђивања генетичког материјала. За обављање ПЦР у реалном времену користећи фрагмента гена (нарочито нуклеинске киселине) у узрочника који се не налази у другим лицима.

Принцип ПЦР је множење одређеним патогеном ДНК фрагмената милиона пута ДНК полимеразом у специјалној јединици, назива и термални циклер, који пружа циклични понављање температурног режима за дати програм.

Диагностицс ПЦР омогућава да понове низ амплификације, одржава активност ензима. Када је појачање одвија глатко, у једном циклусу број примерака одређени део ДНК од патогених дублу, после тридесет циклуса - сто и десет. То је разлог зашто се користи ПЦР у дијагностици да утврди довољно мале патогене, од којих је идентификација је немогуће без ње.

Треба напоменути да РНК не може бити образац за ПЦР у реалном времену. Дакле, у циљу откривања вирусну РНК пре амплификације да се ДНК повезана са одговарајућим фрагментом тога. Реакција ланчаног омогућава производњу ДНК и РНК мерења патогена. Информације тако добијена се користи за праћење ефикасности терапије користи, као и процену клиничком прогнозом.

Поред тога, у реалном времену ПЦР не захтева додатне радње у вези са декрипције циљне ДНК или амплицонс, која служи као баријера за тачне дијагнозе и довести до лажних резултата. Овај приступ омогућава не користити корак електрофорезе, која доводи до смањења ризика производа ланчане реакције полимеразе. Исто тако, због смањења броја манипулација агента, смањује време истраживања, она поједностављује процес, смањује вероватноћу грешке. ПЦР-такође омогућава да одредите почетни број копија ДНК патогена у клиничком испитивању да помогне у идентификовању периоде погоршања и да предузму правовремене мере да излечи пацијента.

Данас постоји велики број појачања метода фиксације у реалном времену. Најчешће коришћени различите технике наношењем Ампликон корелацији с флуорогенична сондама, чији интензитет зрачења варира у зависности од акумулацију ампликона и регистрованих у реалном времену помоћу специјалног уређаја који се зове Термоциклерски оптичким модулом. Обезбеђује висок ниво осетљивости анализе. Истовремено ПЦР производа може бити откривена, заједно са великом количином нуспроизвода, у време када се користи електрофореза га у неким случајевима не примећују.

Помоћу ПЦР позитивне и негативне контролне узорке у реалном времену. Дакле, позитивни и негативни узорци у студији анализирани како одвојених узорака, контролним узорком у коме је уведена у сваком таквом узорку и пролази све кораке анализе.

Данас постоји велики број уређаја за извођење ланчане реакције полимеразе. Ово укључује Био-Рад, Апплиед Биосистемс, Цепхеид и Роцхе. Сваки од њих има своје предности и мане

Треба напоменути да је ПЦР - метода дијагностике користе у великим научне, истраживачке и дијагностичких центара широм света, јер даје могућност да спроведе одмах тумачење резултата.